SK-MEL-1 人皮肤黑色素瘤细胞

‍ ‍ 细胞介绍  该细胞由Oettgen F及其同事从一名29岁的患有广泛、快速进展性恶性黑色素瘤的白人男性患者的胸导管中分离建立的。该细胞可产生黑色素，电镜检测发现细胞中色素颗粒与自身合成和吞噬作用相关。在63%的恶性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者体内发现了针对该细胞系的抗体。   细胞特性 1） 来源：皮肤黑色素瘤 2） 形态：球形，悬浮生长 3） 含量：>1x106 个/mL 4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装   运输和保存 可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式： （1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏； （2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。   细胞用途 ：仅供科研使用。                         细胞培养步骤 一．培养基及培养冻存条件准备： 1） 准备MEM-EBSS培养基(Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle’s Balanced Salts) (MEM-EBSS) )( MEM，GIBCO,41500034,添加EBSS)，90%；优质胎牛血清，10%。 2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为95%。 3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。 二． 细胞处理： 1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 2） 细胞传代：  对于悬浮细胞，传代可参考以下方法： 方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。 ‍ ‍