KG-1 急性髓系细胞白血病细胞

‍ ‍ 细胞介绍 KG1细胞系由H.P.Koeffler和D.W.Golde建立。骨髓抽自一个59岁的患有红白血病而后又发展成急性骨髓原性白血病的男性白人。KG1细胞在形态上类似急性髓原白血病，表现为明显的多形化，骨髓母细胞和骨髓细胞占优势。少量细胞是成熟的粒细胞，也有微量的巨噬细胞和嗜红细胞。   细胞特性 1） 来源：骨髓 2） 形态：原粒细胞，悬浮生长 3） 含量：>1x106 个/mL 4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5） 规格：T75瓶或者1mL冻存管包装   运输和保存 （1 ）使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。 （2 ）收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至250px培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。   细胞用途 ：仅供科研使用。                         细胞培养步骤 一．培养基及培养冻存条件准备： 1） 准备IMDM培养基(IMDM:GIBCO,货号12440-053)，80%；优质胎牛血清，20%。 2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。 二． 细胞处理： 1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 对于悬浮细胞，传代可参考以下方法： 方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。 ‍ ‍